Examinando por Autor "Vernal Astudillo, Rolando"
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Ítem Linfocitos T colaboradores (Th) 9 y Th22 y su asociación con las enfermedades periodontales(Universidad de Valparaíso, 2016-01) Díaz Zúñiga, Jaime; Vernal Astudillo, Rolando; Carvajal Pavez, Paola; Parraga San Román, MarioLas periodontitis son enfermedades infecciosas cuya etiología es la biopelícula patogénica subgingival, constituida principalmente por bacterias anaerobias Gram-negativas. Durante la respuesta inmune del hospedero, estas bacterias son reconocidas por células dendríticas periodontales, las que, una vez activadas expresan moléculas co-estimuladoras y liberan citoquinas pro-inflamatorias y quimioquinas, determinantes de la presentación antigénica a los linfocitos TCD4+. Durante esta presentación antigénica, las células dendríticas inducen la activación, proliferación y diferenciación selectiva de los linfocitos TCD4+ hacia los distintos fenotipos efectores T colaboradores (del inglés T helper, Th), caracterizados por la expresión y secreción de un patrón particular y fenotipo-específico de citoquinas que determina el tipo de respuesta inmune en el hospedero y, finalmente, el fenotipo clínico de las periodontitis. Recientemente se demostró que los linfocitos Th9 son determinantes clave de la inflamación local descrita en la psoriasis y los linfocitos Th22 de la destrucción ósea asociada a la artritis reumatoide. Dado que, aunque la etiología es diferente, los fenómenos patogénicos descritos en las periodontitis poseen características similares a los descritos en la psoriasis y la artritis, es factible proponer que los linfocitos Th9 o Th22 podrían cumplir un rol en la inflamación y destrucción ósea características de las periodontitis. En este estudio, en biopsias obtenidas de lesiones periodontales de pacientes afectados de periodontitis crónica, gingivitis y sujetos sanos, se cuantificaron las citoquinas y los factores de transcripción asociados a los fenotipos linfocitarios Th9 y Th22. Mayores niveles de expresión de IL-22 y AhR (específicos del fenotipo Th22) se detectaron en biopsias de lesiones periodontales de pacientes con periodontitis crónica en comparación a las obtenidas de sujetos sanos y un incremento en los niveles de expresión de IL-9 y Spi.B (específicos del fenotipo Th9) se detectó en biopsias obtenidas de pacientes con gingivitis en comparación a las de pacientes con periodontitis crónica y sujetos sanos. Adicionalmente, con el objetivo de demostrar el rol de los linfocitos Th9 y Th22 durante de la infección periodontal, se evaluó la respuesta de las células dendríticas y los linfocitos TCD4+ naïve humanos ante el estímulo in vitro con los serotipos a, b o c de Aggregatibacter actinomycetemcomitans, uno de los microorganismos componentes de la biopelícula patogénica subgingival causante de las periodontitis. En células dendríticas, ante el serotipo b, el más inmunogénico y más prevalente en las periodontitis, se detectaron mayores niveles de expresión y secreción de TNF-α e IL-6 (asociados a los fenotipos Th1 y Th17, respectivamente) en comparación con los serotipos a o c. En los linfocitos TCD4+ naïve, ante el serotipo b se detectaron mayores niveles secreción de IL-22 y expresión de AhR (específicos del fenotipo Th22) en comparación a las mismas células estimuladas con los serotipos a o c. En conjunto, estos datos permiten establecer que: (1) un incremento en la respuesta tipo Th22 se observa durante la periodontitis y (2) serotipo b de A. actinomycetemcomitans tiene un mayor potencial inmuno-estimulador de tipo Th22 comparado con los serotipos de menor patogenicidad. Por lo tanto, los linfocitos Th22 se asociarían a la patogenia de la periodontitis.Ítem Producción de citoquinas por células dendríticas estimuladas por periodonto-patógenos: Rol de la regulación mediada por miRNA-146a, -146b y -155(Universidad de Valparaíso, 2015-12) Melgar Rodríguez, Samanta; Vernal Astudillo, Rolando; Carvajal Pavez, Paola; Parraga San Román, MarioLas periodontitis son un conjunto de enfermedades de naturaleza inmuno-inflamatoria y etiología infecciosa cuya causa principal es la biopelícula subgingival. Esta biopelícula está conformada por una amplia variedad de bacterias Gram-negativas anaerobias, entre ellas, Aggregatibacter actinomycetemcomitans. En particular, A. actinomycetemcomitans despliega su potencial patogénico mediante la expresión de diversos factores de virulencia, tal como el lipopolisacárido (LPS). Sobre la base de las variaciones estructurales y composición molecular del O-polisacárido, inmunógeno principal del LPS, en A. actinomycetemcomitans se describen 6 serotipos bacterianos distintos; entre ellos, los serotipos a, b y c son los de mayor prevalencia en humanos. Trabajos previos de nuestro grupo de investigación han mostrado que los distintos serotipos de A. actinomycetemcomitans poseen una inmunogenicidad distinta. En particular, cuando las células dendríticas, iniciadores de la respuesta inmuno-inflamatoria desarrollada por el hospedero, fueron estimuladas con el serotipo b de A. actinomycetemcomitans se indujo mayor producción de citoquinas pro-inflamatorias en comparación a la estimulación con los otros serotipos bacterianos. Recientemente, se ha propuesto que los microRNAs (miRNA) cumplen un rol importante en la regulación y definición del tipo de respuesta inmune inducida ante los microorganismos. Así, podrían cumplir un rol en la variabilidad de la respuesta descrita en las células dendríticas ante los distintos serotipos de A. actinomycetemcomitans. En este trabajo de investigación, se cuantificaron los niveles de expresión de los miRNA-146a, -146b y -155 en células dendríticas humanas estimuladas con los serotipos a, b o c de A. actinomycetemcomitans y se asoció su expresión a la producción de citoquinas pro in flamatorias . Las células dendríticas estimuladas con el serotipo b de A . actinomycetemcomitans expresaron mayores niveles de miRNA-146a, -146b y -155 y este incremento se asoció a una mayor producción de citoquinas pro-inflamatorias; permitiéndonos especular que existen vías alternas de regulación a la señalización mediada por receptores de reconocimiento de patrones microbianos, las que son capaces de determinar una respuesta variable en las células dendríticas.