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- Undergraduate thesisYear: 2025
Item type:Item, Efecto de la administración intranasal de BIST23, un potenciador de las dinaminas, sobre la función cognitiva y densidad de espinas dendríticas en neuronas hipocampales de ratones 3xTg, modelo murino de la enfermedad de Alzheimer ;Munizaga Saavedra, Maira ;Directora de tesis: González Jamett, ArlekCo-directora de tesis: Gómez Soto, BárbaraLa enfermedad de Alzheimer (EA) es una enfermedad neurodegenerativa que se caracteriza por deterioro cognitivo progresivo y pérdida sináptica, siendo esta última una alteración temprana clave en la patología. Un modulador de la densidad y función sináptica en el cerebro mamífero son las dinaminas, éstas son GTPasas capaces de remodelar membranas y citoesqueleto, favoreciendo la morfogénesis de neuritas y espinas en neuronas del sistema nervioso. En la EA se ha descrito que las dinaminas disminuyen su expresión, lo que sugiere que la modulación positiva de su actividad podría tener efectos protectores contra los signos tempranos de la EA. El presente estudio evaluó el impacto de la administración intranasal de BIST23, un potenciador de la actividad de las dinaminas en ratones 3xTg modelo de EA, y controles WT silvestres (wildtype). Mediante el test de Morris Water Maze (LAM) se evaluó memoria espacial y mediante el test de reconocimiento de objetos nuevos (NOR) se analizó memoria de reconocimiento. Además, se analizó la densidad de espinas dendríticas en neuronas hipocampales en rebanadas cerebrales teñidas con Golgi-Cox. Los resultados conductuales mostraron que los animales 3xTg presentaron déficits en tareas de memoria espacial y reconocimiento, en comparación con los grupos WT. Si bien el tratamiento con BIST23 no logró prevenir de manera significativa estos déficits, se observó una tendencia a un aumento en el rendimiento del grupo 3xTg tratado con BIST23. A nivel sináptico, se observó una disminución significativa en la densidad de espinas dendríticas en los animales 3xTg tratados con VEH, reflejando una pérdida sináptica asociada a la progresión de la EA. En los animales 3xTg tratados con BIST23 se previno este efecto. En conjunto, estos resultados sugieren que BIST23 podría modular positivamente la estructura sináptica en condiciones neurodegenerativas y representar una estrategia terapéutica potencial para la EA. La vía intranasal demostró ser eficiente para la administración del compuesto. En el futuro se requerirán más estudios para confirmar su eficacia funcional y explorar mecanismos implicados.Universidad de Valparaíso View document - Doctoral thesisYear: 2026
Item type:Item, Biophysical study of the endoplasmic reticulum master regulator protein, bip, as a molecular motor ;Alfaro Valdés, HildaWilson, ChristianLa translocación de proteínas hacia el retículo endoplásmico (RE) es un proceso celular fundamental, esencial para el correcto plegamiento, modificación y direccionamiento de las proteínas secretoras y de membrana. En eucariotas, este proceso ocurre mediante mecanismos cotraduccionales o postraduccionales; estos últimos son responsables de la translocación de proteínas al RE. A pesar de su importancia biológica, la vía postraduccional sigue siendo desconocida. El translocón Sec61 constituye el canal central por el que los polipéptidos atraviesan la membrana del RE. La chaperona residente del RE, BiP (por sus siglas en inglés, immunoglobulin binding protein), miembro de la familia Hsp70, desempeña un papel clave en este proceso al interactuar tanto con el sustrato polipeptídico como con el complejo Sec62/Sec63 asociado a Sec61, utilizando la energía derivada de la hidrólisis de ATP para facilitar la translocación y el plegamiento en el lumen del RE. Sin embargo, el mecanismo mecanoquímico mediante el cual BiP opera durante este proceso sigue siendo objeto de debate. Se han propuesto dos modelos: un trinquete browniano (Brownian ratchet) pasivo, en el que BiP impide el retroceso del polipéptido sin generar una fuerza mecánica mayor que la del baño térmico; y un modelo activo de golpe de potencia (power stroke), en el que BiP convierte la energía química en trabajo mecánico para impulsar el sustrato a través del canal. Un estudio reciente de molécula única demostró que la secuencia señal del precursor del factor alfa (ppαF) permanece asociada al complejo Sec61 durante aproximadamente 17 segundos, lo que sugiere una ventana temporal en la que BiP puede interactuar de manera productiva con el dominio J de Sec63. Aunque el papel exacto del dominio J aún no está completamente definido, se ha propuesto que la interacción entre BiP y el dominio J de Sec63 reduce la especificidad de BiP para sus sustratos, lo que le permite unirse a regiones extendidas de la cadena polipeptídica. En contraste, BiP en solución reconoce preferentemente un motivo consenso definido, Hy(WX)HyXHyXHy, donde Hy representa un residuo aromático o hidrofóbico voluminoso, W corresponde a triptófano y X puede ser cualquier aminoácido. Mediante el análisis de la cinética de translocación, caracterizamos la función motora de BiP mediante ensayos de protección frente a la proteasa in vitro utilizando microsomas de Saccharomyces cerevisiae y proteínas quiméricas diseñadas que contienen todos los componentes necesarios para la translocación postraduccional. Para ello, diseñamos constructos quiméricos compuestos por un péptido señal (reconocido por Sec61), una región desplegada (Dominio I27 mutante de Titina) que confiere competencia para la translocación y un dominio plegado correspondiente a una proteína de alta o baja fuerza de desplegamiento, previamente reportados en la literatura mediante pinzas ópticas (optical tweezers). En primer lugar, se utilizó como control positivo una proteína quimérica compuesta por dos dominios del dominio I27 mutante de Titina en el ensayo de protección frente a proteasas, la cual se translocó hacia los microsomas a una tasa de 0,61 %/min. Por el contrario, la proteína quimérica de Top7 (que requiere 20 pN para su desplegamiento) no mostró translocación detectable, mientras que la quimera de calmodulina, cuyo desplegamiento ocurre a 7 pN, exhibió una tasa de translocación de 0,03 %/min. Esta baja eficiencia de translocación in vitro sugiere que BiP no ejerce fuerzas suficientes para desplegar las proteínas y permitir su translocación. Además, el trabajo mecánico estimado y la potencia de salida fueron comparables a la energía térmica local y de órdenes de magnitud menores que los de motores moleculares de tipo activo (power stroke) bien caracterizados, respectivamente. En conjunto, sugerimos que estos resultados descartan un mecanismo en el que BiP genera un trabajo mecánico sustancial para traccionar y desplegar los sustratos en translocación y, en su lugar, respaldan un mecanismo de tipo trinquete (ratchet) para la translocación de proteínas mediada por BiP.Universidad de Valparaíso View document - Doctoral thesisYear: 2025
Item type:Item, Role of BK channels in hippocampal synaptic plasticity during neonatal development ;Ancatén González, CarlosChávez Navarrete, AndrésLos canales de potasio activados por calcio y voltaje (BK) pueden controlar la función neuronal, pero su relevancia funcional en cambios que dependen de actividad de la función sináptica permanece inconclusa. En esta tesis, nosotros discutimos y presentamos evidencia experimental que demuestra que los canales BK participan en una forma de plasticidad sináptica durante la etapa temprana del desarrollo del hipocampo en ratones. En las entradas excitatorias de las colaterales de Schaffer a las neuronas piramidales de CA1 (Sch-CA1), nosotros reportamos que la estimulación a baja frecuencia repetitiva activa a los canales BK, pero no los canales TRPV1, a través de 12(S)HPETE, un metabolito derivado del ácido araquidónico, producido río debajo de los receptores metabotrópicos de glutamato (mGluRs) para gatillar la depresión a largo plazo (LTD) en la sinapsis CA3-CA1 en rebanadas de hipocampo de ratones de P7-P10 de edad, pero no en animales maduros (P20-P30). De manera notable, la activación de los canales BK es específica de subunidad, ya que la paxilina, pero no la iberiotoxina, bloquearon la depresión mediada por mGluRs. Además, 12(S)HPETE no cambia las propiedades electrofisiológicas del canal BK cuando la subunidad BKα es expresada sola, pero incrementa la probabilidad de apertura del canal cuando la BKα es co-expresada con la subunidad β4. La activación de los canales BK β4 es solo requerida para la inducción, pero no para la expresión de la LTD, una forma de plasticidad que también involucra la activación de calcineurina y síntesis de proteínas. Finalmente, nosotros presentamos evidencia que la LTD mediada por los canales BK β4 coexiste con otra forma de LTD presináptica (LTD dependiente de CB1) en la sinapsis Sch-CA1 en etapa temprana de desarrollo, cuyo mecanismo también cambia en cuanto el desarrollo sináptico hipocampal continúa. Así, nuestros hallazgos revelan diferentes mecanismos celulares que regulan la fuerza sináptica durante el desarrollo postnatal en las sinapsis centrales, destacando la contribución de los canales BK a la regulación dependiente de la actividad de la eficacia sináptica y su activación por mensajeros lipídicos para regular la función sináptica a largo plazo en la sinapsis Sch-CA1 del hipocampo neonatal.Universidad de Valparaíso View document - Undergraduate thesisYear: 2022
Item type:Item, Metaosis : reutilización del denim como una contribución a la moda sostenible en Chile. ;Torres Foster, MacarenaRumié Bertoni, MarienaLa contaminación textil no es algo desconocido, con tal avanza el tiempo, las diferentes industrias siguen creando nuevos productos. Debido al mercado actual, el cual propone un flujo constante de prendas de rotación rápida debido a las modas y tendencias. El consumo constante de ropa provocado debido a la poca durabilidad de las prendas, genera desecho a corto plazo, el cual mayoritariamente termina en la basura. Acorde al tiempo, este continúa, generando más y más basura, lo cual origina la creación de basurales de prendas de ropa. La principal problemática presente en este proyecto es la contaminación textil, debido a la creación de desechos mayormente derivados a la mala durabilidad de los productos. Es a partir de ello que se genera una urgencia el buscar alternativas de reutilización antes del reciclaje. Las intenciones de este proyecto es mostrar a partir de este proyecto una propuesta de diseño sostenible que busque inspirar a otras generaciones a fomentar el uso de materiales en descarte, dañados o en desuso. Conforme avanza el tiempo, se necesita proponer un diseño consciente con el medio ambiente y por consiguiente contribuir al contexto ambiental actual.Universidad de Valparaíso View document