Especificidad en la regulaciĆ³n de endocitosis por subunidades auxiliares del canal de calcio en ovocitos de Xenopus Leavis
Date
2017-04
Authors
Profesor GuĆa
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Universidad de ValparaĆso
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Facultad
Facultad de Medicina
Departamento o Escuela
Escuela de Medicina
Determinador
Recolector
Especie
Nota general
Opta al Grado de MagĆster en Ciencias MĆ©dicas, menciĆ³n en BiologĆa Celular y Molecular
Abstract
El calcio es uno de los mensajeros intracelulares mĆ”s abundante, y media mĆŗltiples e importantes funciones en la cĆ©lula. El transporte de calcio estĆ” principalmente controlado por los canales de calcio activados por voltaje (CCAV), que son proteĆnas multimĆ©ricas conformadas por una subunidad formadora del poro (CavĪ±1) y tres subunidades auxiliares (Ī±2-Ī“, Ī² y Ī³).
La interacciĆ³n entre CavĪ±1 y la subunidad auxiliar Ī² (CavĪ²) ocurre en un sitio denominado AID (alpha-interaction-domain), la uniĆ³n de CavĪ² al canal aumenta la expresiĆ³n funcional del canal, presumiblemente por la liberaciĆ³n de proteĆnas del canal desde el retĆculo endoplĆ”smico.
Existe evidencia que CavĪ² no sĆ³lo participa del transporte del canal hacia la membrana plasmĆ”tica, sino tambiĆ©n que modula su funciĆ³n, especĆficamente aumentando la probabilidad de apertura de Ć©ste a voltajes fisiolĆ³gicamente relevantes.
Trabajos anteriores de este laboratorio muestran que CavĪ²2a regula tambiĆ©n la remociĆ³n de canales desde la membrana plasmĆ”tica a travĆ©s de una interacciĆ³n con dinamina. Esta interacciĆ³n requiere de la formaciĆ³n de dĆmeros de CavĪ²2a, donde contribuye un puente di-sulfuro entre cisteĆnas expuestas.
En esta tesis se investigĆ³ si la isoforma CavĪ²3xo carente de esta cisteĆna promueve endocitosis dinamina-dependiente. Para esto se desarrollĆ³ un bio- ensayo de endocitosis que consistĆa en medir la captaciĆ³n de la enzima horseradish peroxidasa (HRP) por ovocitos de Xenopus inyectadas con distintas combinaciones de CavĪ² previamente purificadas. Esto nos permitiĆ³ demostrar que subunidades CavĪ² promueven la endocitosis sin la presencia de la subunidad CavĪ±1. Se observĆ³ que CavĪ²3xo tambiĆ©n es capaz de promover endocitosis de manera dinamina-dependiente pero con una eficacia un 50% menor.
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Auspiciador
Keywords
CANALES DE CALCIO, ENDOCITOSIS, PEROXIDASAS