Papel del Carboxilo terminal de la conexina 43 en la permeabilidad de la membrana plasmática mediada por hemicanales

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2018

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Universidad de Valparaíso

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Departamento o Escuela

Programa de Magister en Ciencias Biologicas Mencion Neurociencias

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Los hemicanales (HCs) son estructuras hexaméricas formadas por conexinas (Cxs), que en la membrana celular forman canales presentando una baja probabilidad de apertura en condiciones de reposo; sin embargo, se abren bajo ciertas condiciones fisiológicas o patológicas contribuyendo a los cambios en la permeabilidad de la membrana celular requeridas como vías de señalización y/o como parte de los mecanismos de muerte celular. El carboxilo terminal (CT) de la Cx43 posee una gran cantidad de dominios de interacción de proteínas y sitios de fosforilación que podrían jugar un rol importante en la regulación de los HCs. Por este motivo, se analizó el papel del CT en la permeabilidad de los HCs formados por Cx43. Para responder a estos objetivos se analizó el efecto de la eliminación del CT de la Cx43 a partir de las posiciones 257 (Cx43Tr257) y 251 (Cx43Tr251). Se utilizaron células HeLa transfectadas con Cx43, Cx43Tr257 y Cx43Tr251, y se determinó el grado de expresión y la localización de estas Cxs en la superficie celular por medio de la expresión de reportero GFP, inmunocitoquímica y biotinilación de proteínas de superficie. Tanto la Cx43Tr257 como la Cx43Tr251 son detectadas en la membrana plasmática de las células, indicando que forman HCs libres. Sin embargo, ambas proteínas forman menos Uniones en Hendidura que la Cx43 silvestre, siendo mucho más escasas para la Cx43Tr251. Se evaluó el grado de permeabilidad de la membrana plasmática utilizando diferentes marcadores de ácidos nucleicos de distinto tamaño, encontrando que la permeabilidad de la membrana plasmática en células que expresan Cx43Tr257 y Cx43Tr 251, es varias veces mayor que las células que expresan Cx43 silvestre. Estos resultados sugieren que el CT de la Cx43 es esencial en la regulación de la actividad y/o permeabilidad de los HCs formados por Cx43.

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Auspiciador

Palabras clave

NEUROCIENCIAS, CONEXINAS, MEMBRANA CELULAR

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