Caracterización parcial de una proteína de membrana de Piscirickettsia salmonis aislada de tejidos naturalmente infectados

Almarza Pizarro, Oscar

Caracterización parcial de una proteína de membrana de Piscirickettsia salmonis aislada de tejidos naturalmente infectados

dc.contributor.advisor	Zahr Tajmuch, Marcela
dc.contributor.author	Almarza Pizarro, Oscar
dc.coverage.spatial	Valparaíso
dc.date.accessioned	2025-12-18T15:54:32Z
dc.date.available	2025-12-18T15:54:32Z
dc.date.issued	2004
dc.description.abstract	El patógeno intracelular Piscirickettsia salmonis es el agente causal del SRS (septicemia rickettsíal de salmónidos), enfermedad sistémica que ha provocado negativos impactos en la industria salmonicultora del sur de Chile. Como contribución a la caracterización de este patógeno, se practicaron métodos de solubílízación con el detergente Triton X-114 y con el uso de la homogenización celular mecánica (Homogenizador celular Braun MSK), además de extracciones diferenciales con SDS y Genapol, con la finalidad de obtener los componentes estructurales de la membrana externa de esta bacteria. Las diferentes metodologías de extracción fueron aplicadas sobre riñones e hígados extraídos asépticamente desde 39 peces (Oncorhynchus kisutch) infectados con la bacteria. A través de los análisis en SDS-PAGE y Westem blot de la fracción final soluble GenS, originada en las etapas de extracción mencionadas, se logró la identificación de tres componentes proteicos principales con pesos moleculares estimados en 99.7, 47.9 y 28.5 kDa. Utilizando procedimientos de efusión, estas proteínas fueron recuperadas desde los geles de acrilamida y sometidas a diversos estudios, lográndose determinar la dependencia de la movilidad electroforética en relación con la temperatura de solubilización de la muestra, observándose una disociación de la banda de mayor peso molecular (-99 kDa) en subunidades de menor peso molecular (-45 kDa) a temperaturas superiores a 70 °C. Además, mediciones de actividad de canal realizadas en membranas artificiales de bicapas lipídícas con las fracciones que contienen ambos grupos de proteínas (-99 kDa y -45 kDa), permitieron detectar la formación de canales, con una conductividad promedio de -1.4 nS. Las características descritas evidencian claramente la presencia de una proteína del tipo porina en la fracción soluble GenS, ya que el cambio migracional efecto de la temperatura corresponde a la disociación de la estructura oligomérica de la proteína. lo que implica la visualización de sus subunidades de menor peso molecular. Además, ambas fracciones comparten la misma conductividad promedio, la que se encuentra en el rango descrito para porinas de la membrana externa de otras bacterias gram negativas.
dc.facultad	Facultad de Ciencias del Mar y de Recursos Naturales
dc.identifier.uri	https://repositoriobibliotecas.uv.cl/handle/uvscl/16881
dc.language.iso	es
dc.publisher	Universidad de Valparaíso
dc.rights	Atribución-NoComercial-CompartirIgual 3.0 Chile (CC BY-NC-SA 3.0 CL)
dc.rights.uri	http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/3.0/cl/
dc.subject	PROTEÍNA DE MEMBRANA
dc.subject	PISCIRICKETTSIA SALMONIS
dc.subject	CARACTERIZACIÓN
dc.title	Caracterización parcial de una proteína de membrana de Piscirickettsia salmonis aislada de tejidos naturalmente infectados
dc.type	Thesis
dc.ubicacion	M AL445c 2004
uv.catalogador	CAS CDM
uv.codigo.barra	00092282
uv.departamento	Escuela de Biología Marina
uv.notageneral	Título profesional Biólogo Marino. Licenciado en Biología Marina.
uv.profesorinformante	Collantes Saa, Gloria
uv.profesorinformante	Kuznar Hammarstrand, Juan