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Examinando Facultad de Medicina por Autor "Acevedo Gutiérrez, Cristian"
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Ítem Análisis citológico comparativo del efecto de scaffold microestructurado v/s sin microestructura a distintas concentraciones de células de la línea celular mioblástica C2C12(Universidad de Valparaíso, 2018) Bezjak Carrasco, Dragica; Brown González, Donald; Acevedo Gutiérrez, CristianLa ingeniería de tejidos es una ciencia que ha estado en expansión desde sus inicios, siendo principalmente utilizada en el área clínica para tratamientos de regeneración de tejidos, pero que actualmente está teniendo aportes en el área de alimentación. Es en este contexto en el que la ingeniería de tejidos puede ser una opción para la generación de carne in-vitro, con células de músculo esquelético, lo que tendría un gran impacto en el medio ambiente, siendo una posible respuesta a los problemas que causa la industria ganadera, como la contaminación en sus procesos, deforestación y maltrato animal. Este proyecto está enfocado en la generación de carne in-vitro, utilizando scaffolds de materiales no derivados de mamíferos, sembrados con células de la línea celular C2C12, correspondiente a mioblastos. Se utilizó un scaffold microestructurado de superficie acanalada, lo que debería ayudar a las células en su proceso de colonización y diferenciación y se utilizaron dos distintas concentraciones celulares. Para evaluar la efectividad de este scaffold microestructurado y la óptima concentración celular, se utilizó procesamiento histológico de rutina, técnica de tinción histoquímica Tricrómico de Arteta para describir la morfología celular e inmunohistoquímica para identificar distintos estados celulares con marcadores de proliferación, diferenciación y muerte celular, además de un conteo celular y medición del perímetro de grupos celulares. Los resultados obtenidos mostraron similar morfología celular en todas las situaciones y en cuanto a los estados celulares, los resultados de conteo e inmunohistoquímica no fueron concluyentes en todas las situaciones, pero sí demostraron que la mayor cantidad de células en diferenciación y la menor cantidad de células con muerte celular se dio en el scaffold sin microestructura con un millón de células, por lo cual este sería el más adecuado para las células. Esta tesis está inserta en el marco del Proyecto FONDECYT 1160311.Ítem Análisis citológico comparativo del efecto Scaffold microestructurado versus sin microestructura a distintos tiempos de cultivo y diferenciación(Universidad de Valparaíso, 2019) Madariaga Alfaro, Camila; Brown González, Donald; Acevedo Gutiérrez, CristianEn los últimos años se ha expandido el estudio del tejido muscular esquelético vinculado a la ingeniería de tejidos. Esto debido a que presenta una potencial alternativa de solución para el reemplazo de tejidos, por daño o defecto de los músculos y de órganos en general. No obstante, existe otra rama menos estudiada debido a los retos técnicos que presenta, y es la posibilidad de usar esta tecnología de tejidos para crear carne in vitro. En este estudio se utilizó la rama de la ingeniería de tejidos que comprende scaffolds con una estructura tridimensional específica cultivada con células mioblastos de la línea celular C2C12 en un medio favorable de nutrientes, y factores de crecimiento y diferenciación determinado. Para estudiar el efecto de la estructura se usó un scaffold de microestructura superficial acanalada, y otro scaffold sin estructura definida o de estructura lisa. Los scaffolds tuvieron 0, 7, 14 y 21 días de cultivo celular para discriminar los cambios ocurridos durante el proceso de diferenciación y determinar el momento óptimo de maduración muscular de las células. Se procesaron los scaffolds con técnica histológica e inmunohistoquímica para realizar un conteo celular y H-Score de los marcadores PCNA, desmina, miogenina y MYH. Con esto se buscó una alternativa a la producción de proteína animal como solución a los problemas medioambientales de la industria ganadera, la escasez de recursos naturales, el maltrato animal y las enfermedades transmitidas por el consumo de carne animal. Los resultados muestran que los scaffolds utilizados permiten la viabilidad y el crecimiento celular, no así la diferenciación musculoesquelética. El scaffold microestructurado resultó ser la matriz óptima para la vitalidad, proliferación y asociación celular, y el scaffold liso como el óptimo para diferenciación celular, siendo el día 7 el de mejores resultados en general. No obstante, se evidenció una escasa diferenciación y adhesión celular que puede estar relacionado a la metodología de cultivo de los scaffolds, las propiedades de los materiales utilizados, entre otros.