Examinando por Autor "Weinstein Oppenheimer, Caroline (Directora de tesis)"
Mostrando 1 - 7 de 7
Resultados por página
Opciones de ordenación
Ítem Determinación de la frecuencia de beta talasemia en población atendida en el laboratorio clínico de Clínica las Condes(Universidad de Valparaíso, 2014) Villagra Montenegro, Lorena; Weinstein Oppenheimer, Caroline (Directora de tesis)La anemia ferropriva y la talasemia menor o β talasemia son patologías que se presentan con microcitosis e hipocromía en el hemograma. Sin embargo, son condiciones con etiología y tratamiento diferentes. La anemia ferropriva se produce por una disminución de los depósitos de hierro en el organismo. La talasemia menor, es una condición genética heterocigota que determina una disminución de la producción de la cadena β de la hemoglobina. Esta condición de portador no representa un problema de salud para el afectado, pero significa un riesgo de condición homocigota grave, talasemia mayor, para sus descendientes en caso de coincidir con una pareja portadora. El diagnóstico diferencial es relevante porque la conducta terapeútica es totalmente distinta para cada condición. La anemia ferropriva requiere suplementación con hierro, tratamiento contraindicado en la β talasemia porque conduce a una sobrecarga de hierro de los individuos. El objetivo de esta tesis fue determinar la frecuencia de β talasemia y anemia por deficiencia de hierro como causas de anemia microcítica hipocrómica entre los pacientes que se atienden en el laboratorio de Clínica Las Condes. Para cumplir este objetivo se planteó un estudio descriptivo de corte transversal, que incluyó pacientes adultos entre 18 y 65 años que presentaban microcitosis e hipocromía en el hemograma. En sangre venosa se determinó capacidad total de fijación de hierro (TIBC), ferritina, hemoglobina A2 y hierro sérico para hacer el diagnóstico diferencial entre las dos condiciones. El hemograma se realizó en un contador hematológico automatizado, el hierro sérico y TIBC en suero en un analizador automático con métodos de punto final. La ferritina fue determinada en suero con un inmunoensayo efectuado en un equipo automatizado y la hemoglobina A2 se determinó por electroforesis en un equipo comercial. Los resultados demostraron un 37% de casos de talasemia en 30 individuos estudiados, con un predominio del sexo masculino (64%). Además, la razón %microcitosis/%hipocromía, se evidenció como una nueva herramienta para la orientación diagnóstica de las anemias ferroprivas y talasemias. Esta investigación constituye un aporte al conocimiento de la realidad nacional en cuanto a la prevalencia de esta condición y a la vez aplica por primera vez una herramienta de tamizaje simple sin costo adicional a un hemograma.Ítem Discordancia e inconsistencia genotípica en un caso de paternidad para los marcadores D18S51, D16S539, D7S820 y D2S1338(Universidad de Valparaíso, 2017) Mellado Rioseco, Pedro; Weinstein Oppenheimer, Caroline (Directora de tesis)En un caso de filiación humana, específicamente de determinación de paternidad, que se realizó en el Servicio Médico Legal (SML) de Valparaíso, utilizando el sistema de amplificación de repeticiones cortas en tándem PowerPlex Fusion®, se presentó inconsistencias en los resultados de marcadores D18S51, D7S820, D2S1338 al momento de realizar la relación de los genotipos, lo que fue rectificado a través del sistema AmpFlSTR® Identifiler®, persistiendo las diferencias. Por otra parte, se presentó una discordancia entre los sistemas de amplificación en el marcador D16S539. El método de secuenciación consideró la amplificación selectiva STR, utilizando partidores descritos en Gen Bank, con excepción del partidor antisentido del marcador D16S539. La separación de los amplicones fue realizada por electroforesis en gel de Agarosa HR, de la cual posteriormente fueron purificados utilizando el Kit QIAquick Gel Extraction Qiagen y luego secuenciados con el kit BigDye® v1.1 Applied Biosystems. Los resultados se obtuvieron utilizando un secuenciador automático modelo Abi Prism 310. Las inconsistencias en los marcadores STR D18S53 D2S1338 fueron corroboradas y asociadas con deleciones. La inconsistencia de D7S820 fue definida como variante genética. En el caso de la discordancia que presenta la madre, se logró determinar que existía una deleción de 4pb consecutivas lo que explica los resultados incoherentes entre los sistemas de amplificación. En conclusión, las discordancias e inconsistencias son fenómenos que se observan en la amplificación selectiva de STR y se explican por mutaciones en las zonas STR o aledañas. Este estudio contribuye al proceso de evaluación permanente que debe existir en los protocolos aplicados en el SML.Ítem Estudio de la relación entre los valores urinarios de VEGF en prematuros y la aparición de hemangioma infantil en los primeros 3 meses de vida(Universidad de Valparaíso, 2018) Coloma Espinoza, Rodrigo; Weinstein Oppenheimer, Caroline (Directora de tesis)El nacimiento de un niño(a) prematuro(a) es un desafío, debido a su elevada morbilidad, el aumento de casos nuevos año a año, así como su sobrevida asociada a secuelas. El recién nacido prematuro (RNPT) se relaciona con Hemangioma Infantil (HI) hasta un 23%, en los casos de muy bajo peso. Este tipo de lesiones se pueden complicar con ulceración, pérdida de la visión, compromiso de las vías respiratorias, insuficiencia cardíaca y hasta la muerte. Además puede producir desfiguración y cicatrices. Su etiopatogenia se ha asociado a fenómenos de angiogénesis y vasculogénesis, interviniendo en este proceso innumerables mediadores ligados a la hipoxia, dentro de los que destaca el factor de crecimiento vascular, VEGF. Además el tratamiento precoz con beta bloqueadores ha demostrado prevenir complicaciones, secuelas y cirugía, adquiriendo especial relevancia el diagnóstico temprano. El objetivo de este estudio fue contar con el apoyo de un parámetro objetivo e inocuo, que asocie los valores urinarios de VEGF y la relación a desarrollar HI, buscando la concentración de VEGF en orina mediante un inmunoensayo (QuantiGlo®Elisa) corregido con proteínas en orinas aisladas. Si bien los resultados en este ensayo, no permiten relacionar los niveles de VEGF en orina con la aparición de HI, se observaron valores inferiores de proteinuria en los casos con HI, dejando entrever nuevas posibilidades de estudios, para asociar proteínas en orina y la aparición de HI.Ítem Expresión y secreción de factor de crecimiento transformante β₃ en células madre mesenquimáticas CD105 positivas(Universidad de Valparaíso, 2012) Reyna Jeldes, Mauricio; Weinstein Oppenheimer, Caroline (Directora de tesis)En el continuo desarrollo de nuevas tecnologías para la curación de problemas de salud como las quemaduras y otras lesiones de la piel, la medicina regenerativa ha incorporado entre los métodos para su tratamiento la terapia celular. Esta última se ha vinculado en la actualidad al uso de implantes de células madre adultas para mejorar el proceso de curación de lesiones cutáneas. A estas innovaciones tecnológicas se suman los avances realizados en el esclarecimiento de las rutas bioquímicas que permiten la reparación de las heridas y las biomoléculas involucradas en cada fase del proceso. Todo esto abre un nuevo desafío: establecer los mecanismos por los que estos sistemas de implante que contienen células madre consiguen una reparación rápida y efectiva de las heridas de la piel, conocimiento que resultará ser crucial para optimizar los dispositivos médicos para medicina regenerativa. De acuerdo a estos planteamientos, la presente investigación se enfocó en la medición de los niveles de factor de crecimiento transformante 3 (TGF- 3) que se producen en células madre mesenquimáticas positivas para endoglina (CD105+) cultivadas en monocapa o inmovilizadas en un sistema de implante de soporte polimérico integrado con un gel de fibrina. La determinación de TGF-β3 en el medio de cultivo se efectuó por ELISA y la expresión génica del mismo gen mediante PCR en tiempo real. Se observó una tendencia a una mayor secreción de TGF-β3 en células integradas en el sistema de implante durante su primer y tercer día de cultivo celular. Los niveles de ARNm para TGF-β3 de células cultivadas en el sistema de implante resultaron indetectables. Estos resultados, aunque requieren más estudios, sugieren una regulación postranscripcional de la expresión de TGF-β3.Ítem Extracción de ARN desde células cultivadas en una matriz polimérica(Universidad de Valparaíso, 2015) Oliva Retamal, Christopher; Weinstein Oppenheimer, Caroline (Directora de tesis)La ingeniería de tejidos representa un avance significativo en la práctica médica actual, en especial los sistemas de implantes que han permitido reparar, reemplazar y recuperar tejidos dañados. En esta disciplina, la relación entre el componente celular y los sistemas de andamiaje que lo sustentan resulta fundamental. Por este motivo es necesario ganar información sobre la influencia que tiene la interacción célula-biomaterial sobre la expresión génica. Las matrices poliméricas pueden estar conformadas por distintos biomateriales que le otorgarán propiedades y funciones específicas. Sin embargo, estos componentes suponen una interferencia sustancial en los procesos de aislamiento de ARN convencionales. Esta interferencia ha sido detectada en un Sistema de Implante Integrado (SII) constituido por gelatina-quitosano-ácido hialurónico que se está usando en ensayos clínicos. Por este motivo es que se planteó como objetivo de esta tesis establecer un protocolo que permita una extracción de ARN de calidad desde el SII. Con este fin se efectuó un análisis comparativo entre cuatro métodos de extracción de ARN, que fueron TRIzol®, CTAB, TRIzol® mas purificación con solvente extendido y aplicando DNeasy Plant Mini Kit (Qiagen®) modificado. La calidad del ARN recuperado se evaluó por indicaciones espectroscópicas de pureza y rendimiento y por su competencia para ser retro- transcrito y permitir la amplificación del gen constitutivo GAPDH. El método comercial de Qiagen® modificado resultó eficaz para producir ARN de alta pureza y funcionalidad en la amplificación de GAPDH. Además se estableció la densidad y tiempo de cultivo para las células en el SII para recuperar el ARN de calidad apropiada. Esta investigación aporta una metodología que permitiría estudiar la expresión génica de células incluidas en el SII, lo que servirá de fundamento para generar nuevas innovaciones en materia de ingeniería de tejidos.Ítem Implementación de metodologías para la detección de alelos nulos para GSTM1 y GSTT1 asociados a eficacia y seguridad de la farmacoterapía del cáncer de mama(Universidad de Valparaíso, 2019) Órdenes Barría, Yennypher; Weinstein Oppenheimer, Caroline (Directora de tesis); Gómez Saavedra, Victor (Co-director de tesis)La Organización Mundial de la Salud señala que el principal problema de salud en la mujer es el cáncer de mama, siendo la primera causa de muerte a nivel mundial. La mortalidad cáncer de mama ha disminuido, debido a la detección precoz y un tratamiento inicial efectivo. Este último se basa principalmente en quimioterapia guiada por perfiles de genotipificación del tumor, sin considerar la genética del paciente y su influencia sobre la farmacocinética y farmacodinamia del fármaco. Por ello, esta investigación tuvo como objetivo implementar metodologías moleculares para la detección de los alelos nulos de GSTM1 y GSTT1 con el fin de complementar la decisión de la farmacoterapia de inicio en el cáncer de mama. Para ello se extrajo ADN genómico de 30 voluntarias sanas, se implementó la metodología de detección de estos genes por reacción en cadena de la polimerasa para luego visualizar sus amplicones, usando la técnica de electroforesis en gel de agarosa. Además se determinó el límite de detección para la metodología propuesta. Se logró implementar la metodología con un límite de detección de 1 pg de material genético y se determinó una frecuencia para los alelos nulos GSTM1 y GSTT1 de 33 y 27%, respectivamente, en la población estudiada. Estos resultados podrán validarse con estudios clínicos futuros para incluir a GSTM1 y GSTT1 como marcadores en un panel genético para decidir la terapia inicial de cáncer.Ítem Propuesta de reglamento chileno para el registro de productos de terapia celular(Universidad de Valparaíso, 2013) Castro Miranda, Angélica; Weinstein Oppenheimer, Caroline (Directora de tesis)El progresivo avance científico y biotecnológico de los últimos tiempos, en cuanto a terapias médicas nace ante la necesidad de resolver problemáticas de salud específicas y que hasta el momento no tienen esperanza de una cura definitiva. El desarrollo de terapias avanzadas, dirigidas a un paciente, seguras y que le brinden una expectativa de tratamiento eficaz, ha llevado a un avance progresivo en terapias de tipo génica, celular y de tejidos, de gran importancia en los últimos años, principalmente durante la última década. Tanto Estados Unidos, pionero en el desarrollo de este tipo de terapias, como la Unión Europea se vieron en la necesidad de generar un marco legal que regule desde la donación, obtención, procesamiento, distribución y utilización de medicamentos biológicos de terapia celular. Por tal razón es importante un conocimiento acabado de la normativa internacional sobre terapias celulares para enfrentar el desafío de desarrollar una propuesta legislativa nacional acorde a las necesidades chilenas, asegurando la seguridad, calidad y efectividad de la terapia. Dado lo expuesto anteriormente, este internado tuvo como objetivo crear una propuesta de reglamento para el registro de productos de terapia celular en Chile. Para conformar dicha propuesta se realizó un análisis crítico de la normativa disponible internacionalmente referente a terapias biológicas avanzadas, como lo es la terapia celular y se recolectó información cualitativa para conocer la opinión de los actores relevantes del medio nacional mediante el desarrollo de un Focus Group, con el objetivo fundamental de establecer definiciones legales precisas que sienten las bases de un régimen regulador apropiado para efectos de registro en el territorio chileno.