Determinación del efecto de misoprostol in vitro sobre la proliferación de células mesenquimales de primordios de extremidades de rata

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2014

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Universidad de Valparaíso

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Facultad de Farmacia

Departamento o Escuela

Laboratorio de Toxicologia

Determinador

Recolector

Especie

Nota general

Químico farmacéutico

Resumen

Durante el desarrollo embrionario ocurren dos procesos distintos de osificación según el tipo de hueso. Uno de estos procesos, la osificación endocondral permite el desarrollo de los huesos largos de las extremidades y procede mediante la diferenciación de células mesenquimales a condrocitos, los que luego proliferan, sufren hipertrofia y mineralización. El proceso es controlado, entre otros, por un conjunto de eicosanoides denominados prostaglandinas, cuyas acciones son mediadas por receptores acoplados a proteína G, dentro de los que se encuentra EP3. Misoprostol es un análogo sintético de prostaglandina E1 que genera contracciones uterinas y dilatación cervical, por lo cual, en algunos países, tiene indicación médica para la interrupción del embarazo. Este medicamento es también teratogénico, pero se desconoce su mecanismo de acción. En un intento por dilucidarlo, en el Laboratorio de Toxicología de la Universidad de Valparaíso se determinó su efecto sobre cultivos de células mesenquimales de rata, observándose un aumento en la captación de rojo neutro por parte de las células expuestas a 20.000 pg/mL de misoprostol, lo que podría explicarse por un aumento en la viabilidad o en la proliferación celular. Siguiendo esta línea de investigación, en esta tesis se utilizó el ensayo de micromasa para determinar la proliferación, viabilidad y diferenciación de células mesenquimales cultivadas en concentraciones crecientes de misoprostol, evaluando además la participación del receptor EP3 en las respuestas inducidas por el medicamento, cultivando las células en presencia del antagonista L-798106. La evaluación se llevó a cabo utilizando tinción con rojo neutro, azul alciano y MTT, para evaluar viabilidad, diferenciación y proliferación, respectivamente. No se observó efectos de misoprostol sobre viabilidad o diferenciación, aunque sí se observó que el aumento en la captación de rojo neutro a una concentración de 20.000 pg/mL de misoprostol se debe a una mayor proliferación celular. Este efecto fue revertido por el uso del antagonista EP3. Sin embargo, este mecanismo no es relevante para explicar la teratogenicidad de la molécula, puesto que esta concentración se encuentra muy por encima de la concentración plasmática alcanzada por una mujer que ha ingerido misoprostol. Se concluye, por tanto, que el mecanismo teratógeno no estaría relacionado con el proceso de proliferación, viabilidad y diferenciación de células mesenquimales.

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Auspiciador

Palabras clave

ANALGESICOS NO NARCOTICOS, MISOPROSTOL

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