Efecto de la fijación química en el reconocimiento de estructuras G-cuádruplex en el DNA

dc.contributor.advisorSan Martín Henríquez, Sebastián
dc.contributor.advisorPárraga San Román, Mario
dc.contributor.authorHerrera Zelaya, Hugo
dc.date.accessioned2022-11-30T21:30:50Z
dc.date.available2022-11-30T21:30:50Z
dc.date.issued2019
dc.description.abstractEn el DNA, la unión de 4 guaninas mediante enlaces de hidrógeno diferentes a los propuestos por Watson y Crick, da lugar a la formación de una estructura cuadrada y plana llamada tétrada-G, y el apilamiento de 3 o más de estas estructuras se conoce como G-cuádruplex. A comienzos del siglo XXI y con el avance de técnicas biofísicas y de biología molecular, se descubrió la presencia de G-cuádruplex en el macronúcleo del protozoo Stylonchia lemnae. En el año 2013 se demostró mediante un anticuerpo específico llamado BG4 la presencia de estas estructuras en células humanas fijadas con formaldehído. Este anticuerpo se une a (interacciona) su antígeno (estructura G-cuádruplex) mediante el censado de una estructura tridimensional más que el de una secuencia nucleotídica. Esto supone un desafío al momento de ser ocupado en estudios inmunohistoquímicos e inmunofluorescentes, ya que fijadores de tipo aditivos como el formaldehido actúan creando enlaces proteína/proteína y proteína/DNA que podrían interferir con el reconocimiento de las estructuras G-cuádruplex mediante anticuerpos. En esta investigación se utilizó el anticuerpo BG4 para comparar la capacidad de inmunodetectar estructuras G-cuádruplex en células MCF-7 fijadas con paraformaldehído o metanol. Mediante microscopia de fluorescencia se evidenció en células fijadas con metanol un 73% más de focos fluorescentes en comparación con células fijadas con paraformaldehído (p<0.0001). Esto indica que el método de fijación que se utilice al estudiar estructuras G-cuádruplex mediante anticuerpos, influye en la cantidad relativa de focos fluorescentes detectados.en_ES
dc.facultadFacultad de Medicinaen_ES
dc.identifier.urihttp://repositoriobibliotecas.uv.cl/handle/uvscl/7701
dc.language.isoesen_ES
dc.publisherUniversidad de Valparaísoen_ES
dc.subjectINMUNOFLUORESCENCIAen_ES
dc.subjectFORMALDEHIDOen_ES
dc.subjectBG4en_ES
dc.subjectTETRADA-Gen_ES
dc.subjectG-CUADRUPLEXen_ES
dc.titleEfecto de la fijación química en el reconocimiento de estructuras G-cuádruplex en el DNAen_ES
dc.typeTesisen_ES
uv.catalogadorDBPSen_ES
uv.departamentoEscuela de Medicinaen_ES
uv.notageneralOpta al grado de Magíster en Ciencias Médicas, mención en Biología Celular y Molecularen_ES
uv.notageneralNo disponible para descargaen_ES

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