El ácido zoledrónico es un potente inhibidor de los canales TRPV1
Fecha
2024
Autores
Profesor Guía
Formato del documento
Thesis
ORCID Autor
Título de la revista
ISSN de la revista
Título del volumen
Editor
Universidad de Valparaíso
Ubicación
ISBN
ISSN
item.page.issne
item.page.doiurl
Facultad
Facultad de Ciencias
Departamento o Escuela
Facultad de Ciencias, Programa de Magíster en Ciencias Mención en Neurociencia
Determinador
Recolector
Especie
Nota general
Magíster en Ciencias Biológicas Mención Neurociencia. Universidad de Valparaíso. 2024.
Resumen
El canal receptor de potencial transitorio vaniloide tipo 1 (TRPV1) es un miembro de la superfamilia de canales de iones del receptor de potencial transitorio (TRP) y es uno de los sustratos moleculares que inician las respuestas relacionadas con el dolor. El ácido zoledrónico (ZOL), es un bifosfonato utilizado en el tratamiento de enfermedades óseas como la osteoporosis, metástasis ósea, entre otras.
A pesar de que el ZOL no se encuentra clasificado como un compuesto analgésico, un efecto colateral de su uso es que produce alivio del dolor. Nuestros antecedentes preliminares realizados mediante electrofisiología, modelado molecular y análisis de docking sugieren que el ZOL podría unirse al sitio de unión del fosfatidilinositol 4,5-bifosfato PI(4,5)P2 y al sitio de unión capsaicina (CAP) del canal TRPV1. En esta tesis se investigó la relevancia del sitio de unión PI(4,5)P2 y el sito de unión CAP en la regulación del canal TRPV1 por ZOL. Para ello, se utilizó diferentes aproximaciones experimentales incluyendo biología molecular, mutagénesis sitio-dirigida, expresión heteróloga de TRPV1 en ovocitos de Xenopus laevis, y electrofisiología mediante la técnica de patch-clamp.
Los registros de corrientes macroscópicas muestran que el ZOL produce una disminución de la corriente del canal TRPV1 WT en un rango de concentraciones entre 1 nM hasta 100 M. El tratamiento con ZOL produce una disminución significativa de la corriente. Este efecto, también se recapitula en registros de canal único donde se observa una notoria disminución de la conductancia unitaria a todas las concentraciones evaluadas. Estas observaciones sugieren fuertemente que el ZOL puede estar actuando como un inhibidor del canal TRPV1. En esta tesis se realizaron mutaciones sitio dirigidas de los residuos Q561, R575 y la triple mutante R575-R579-K688 del sitio de unión PI(4,5)P2, y en los residuos T550, Y511 y E570 del sitio de unión CAP, se registraron mediante patch-clamp en presencia de ZOL. En términos generales se observa que el sitio de unión PI(4,5)P2 tiene un efecto similar al observado sobre el canal silvestre, lo que sugiere que este sitio no participa en la inhibición del canal TRPV1 por el ZOL. Los registros preliminares obtenidos usando la triple mutante T550-Y511-E570 del sitio de unión CAP, indican que posiblemente se encuentra involucrado en la regulación del canal TRPV1 por ZOL. Dando pista para dilucidar la unión del ZOL al canal TRPV1. Sin embargo, es necesario realizar más experimentos mutagénicos en el sitio de unión a CAP para obtener una muestra representativa. Los experimentos de canal único del lado extracelular del canal TRPV1 WT muestran que en presencia de ZOL se produce un colapso de la conductancia de manera inmediata. Lo que sugiere que el ZOL puede unirse al canal TRPV1 en más de un sitio de unión.
Aquí, hemos descrito al ZOL como un nuevo inhibidor del canal TRPV1. Nuestros hallazgos sugieren que los residuos T550, Y511, E570 del sitio de unión CAP se encuentran interactuando con el ZOL. Además, es necesario realizar la caracterización electrofisiológica del lado extracelular del canal TRPV1 en presencia del ZOL.
Descripción
Lugar de Publicación
Valparaíso
Auspiciador
Palabras clave
Licencia
Atribución-NoComercial-CompartirIgual 3.0 Chile (CC BY-NC-SA 3.0 CL)