Efecto de la sobre-expresión de la ligasa de ubiquitina E3, Rnf19a, en un modelo celular heterólogo

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2014

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Opta al grado de Magíster en Ciencias Médicas, mención en Biología Celular y Molecular
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Resumen

La degradación de proteínas constituye uno de los principales sistemas responsables de la apropiada función celular y mantenimiento de la fisiología celular. Este proceso es dirigido por el sistema de ubiquitina proteasoma (UPS), el cual cataliza la transferencia de una o varias moléculas de ubiquitina a la molécula diana, mediante una cascada enzimática. Rnf19a es una ligasa de ubiquitina E3 expresada discretamente en las células somáticas y altamente expresada en testículos. Tiene una localización centrosómica en todas las células y una localización diferencial en el cuerpo XY de espermatocitos en paquitena. Se sabe que DORFIN, el ortólogo humano de Rnf19a, marca para degradación vía proteasoma 26S a una forma mutante de SOD1 que genera agregados en neuronas. Tanto la sobre-expresión como la ganancia de función de enzimas ligasas de ubiqiuitina E3, constituye una característica de muchas enfermedades, incluyendo el cáncer, afectando directamente el destino/regulación de proteínas y, por lo tanto, la función celular normal. En este trabajo exploramos algunos efectos celulares de la sobre-expresión de Rnf19a murino en células humanas. Varios estudios se encuentran focalizados en el estudio de enzimas ligasas de ubiquitina E3 en patologías, para el desarrollo de nuevas terapias. En este estudio, evaluamos el efecto de la sobre-expresión de la ligasa de ubiqutina E3 murina, Rnf19a en células humanas. Métodos: La sobre-expresión de Rnf19a se llevó a cabo con una construcción basada en pCDNA en células MCF-7. Ensayos de adhesión celular y proliferación fueron hechos para evaluar los efectos funcionales de la sobre-expresión de Rnf19a. Resultados: La Sobre-expresión de Rnf19a induce drásticos cambios morfológicos en células MCF-7 transfectadas. La adhesión celular disminuye y la proliferación aumenta en estas células. Conclusiones: La sobre-expresión heteróloga de Rnf19a murino en células MCF-7 afecta la proliferación y adhesión celular. Estos resultados nos permite además delinear un posible rol de esta E3 ligasas en células vivas.

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Auspiciador

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LIGASA DE UBIQUITNA, SISTEMA UBIQUITINA PROTEASOMA

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